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elisa試劑盒白介素類的主要試劑的原料和制備方法
更新時間:2018-06-19   點擊次數(shù):1036次

elisa試劑盒白介素類的主要試劑為固相的抗原或抗體、酶標(biāo)記的抗原或抗體和與標(biāo)記酶直接關(guān)聯(lián)的酶反應(yīng)底物。以下敘述這些試劑的原料和制備方法。

 固相的抗原或抗體稱為免疫吸附劑。將抗原或抗體固相化的過程稱為包被(coating)。由于載體的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板為載體,通常將抗原或抗體溶于緩沖液(zui常用的為pH9.6的碳酸緩沖液)中,加于ELISA板孔中在4℃過夜,經(jīng)清洗后即可應(yīng)用。如果包被液中的蛋白質(zhì)濃度過低,固相載體表面有能被此蛋白質(zhì)*覆蓋,其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會部分地吸附于固相載體表面,zui后產(chǎn)生非特異性顯色而導(dǎo)致本底偏高。在這種情況下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除這種干擾。這一過程稱為封閉(blocking)。包被好的ELISA板在低溫可放置一段時間而不失去其免疫活性醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

    ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標(biāo)本中不存在與標(biāo)記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存,價格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。elisa試劑盒白介素類中常用的酶為辣根過氧化酶(HRP)和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶。

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elisa試劑盒白介素類

 

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